着色性干皮病基因D和p53对HBV复制的影响

摘要：

目的：探讨人着色性干皮病基因D（ XPD）和p53对乙型肝炎病毒（ HBV）复制的影响。方法：使用脂质体转染法把重组质粒pEGFP-N2/XPD和空载质粒pEGFP-N2转染进入人肝癌细胞株HepG2．2．15细胞，转染后的第2天用20μmol/L pifithrin-α（ p53抑制剂）孵育细胞24 h。实验共分为空白对照组、pEGFP-N2组、pEGFP-N2/XPD组、pEGFP-N2/XPD＋pifithrin-α组和pifithrin-α组。使用RT-PCR法检测XPD、乙型肝炎表面抗原（ HB-sAg）、乙型肝炎e抗原（ HBeAg）及乙型肝炎病毒X蛋白（ HBx） mRNA表达的变化；使用ELISA法检测培养上清液中HBsAg和HBeAg含量的变化；用荧光定量PCR法检测培养上清液中HBV-DNA含量的变化；用bDNA法检测细胞内核心颗粒中HBV-DNA含量的变化。结果： RT-PCR结果显示，重组质粒pEGFP-N2/XPD的转染可使得XPD mRNA表达增高，XPD表达增高能使得HBsAg、HBeAg和HBx mRNA表达明显减少，而pifithrin-α能抑制XPD的这一作用（均P＜0．01）。 ELISA结果显示，XPD表达增高能使得培养上清液中HBsAg和HBeAg含量明显减少，而pifithrin-α能抑制XPD的这一作用（均P＜0．01）。荧光定量PCR结果显示，XPD表达增高能使得培养上清液中HBV-DNA含量明显减少，而pifithrin-α能抑制XPD的这一作用（均P＜0．01）。 bDNA结果显示，XPD表达增高使得细胞内核心颗粒中HBV-DNA含量明显减少，而pifithrin-α能抑制XPD的这一作用（均P＜0．01）。结论： XPD能通过p53通路抑制HBV复制，所以XPD和p53可能成为乙型肝炎抗病毒治疗的作用靶点。

关键词：着色性干皮病基因D、p53、HepG2.2.15细胞、肝炎病毒、乙型

分类号：R363(病理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目No．81300348；江西省科技厅社会发展领域项目No．20141BBG70038；江西省卫生厅科技计划项目20141070

在线出版日期：2014-12-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1845-1849