线粒体损伤在创伤弧菌诱导树突状细胞凋亡中的作用

摘要：

目的：探讨线粒体损伤在创伤弧菌（Vibrio vulnificus，Vv）诱导树突状细胞（dendritic cell，DC）凋亡过程中的作用及其可能机制。方法：建立Vv 1．1758与DC2．4细胞混合培养模型。采用扫描电镜和透射电镜观察创伤弧菌侵入细胞方式和细胞线粒体病变情况。荧光探针DCFH-DA和Fluo-8/AM分别检测侵入细胞内活性氧（ ROS）和Ca2＋离子水平。流式细胞术检测细胞线粒体膜电位和细胞凋亡情况。采用Western blotting 检测NF-κB p65和TNF-α蛋白的表达。结果：Vv 1．1758可诱导DC2．4细胞凋亡。 Vv 1．1758以菌体一端与细胞表面结合的方式侵入细胞，侵入细胞的线粒体有明显病变，细胞内ROS和Ca2＋水平升高，线粒体膜电位降低。共培育1 h，NF-κB p65蛋白即开始升高，5 h达高峰，6 h稍有下降；TNF-α蛋白则在共培育2 h开始增高，6 h达高峰。结论：线粒体损伤在Vv诱导DC凋亡中发挥作用，其作用机制可能与细胞内ROS和Ca2＋水平升高、线粒体膜电位降低有关， NF-κB p65和TNF-α可能是细胞凋亡过程中的重要信号分子。

关键词：创伤弧菌、树突状细胞、细胞凋亡、线粒体、NF-κB、肿瘤坏死因子α

分类号：R378.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：2012年度嘉兴市重点科技创新团队No．2012-03；国家级大学生创新创业训练计划项目201310354018

在线出版日期：2014-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1682-1688