IPO8基因启动子区rs35100176位点变异对基因表达的影响

摘要：

目的：研究人importin 8（ IPO8）基因启动子区rs35100176多态性位点CCT插入/缺失对基因表达的影响。方法：PCR扩增IPO8基因启动子区包含rs35100176多态位点的342 bp序列，通过测序获得了49例DNA样本的基因多态性分布。以CCT/CCT插入纯合子或-/-缺失纯合子DNA样本为模板，扩增含有不同插入/缺失序列的IPO8基因启动子片段，插入萤光素酶报告质粒pGL3-Basic，构建pGL3-3N Insertion和pGL3-3N Deletion重组表达载体。重组质粒经Fugene 6．0转染入细胞，采用双萤光素酶报告系统，检测携带不同多态性序列的重组质粒中报告基因的表达活性；real-time PCR 检测各不同基因型细胞中 IPO8 mRNA 表达。结果：通过测序发现rs35100176多态位点存在 CCT/CCT、CCT/-和-/-3种表型，其基因分布频率分别为18.37％、55.10％和26.53％。成功构建pGL3-3N Insertion和pGL3-3N Deletion重组表达载体。双萤光素酶报告基因活性检测结果显示，pGL3-3N Insertion启动下游报告基因表达的相对活性与pGL3-3N Deletion 相比显著减弱，两者存在显著差异（P＜0.05）；real-time PCR结果显示，CCT纯合插入的HEK293细胞中IPO8 mRNA的表达显著低于CCT纯合缺失的Saos-2细胞。结论：IPO8基因启动子区rs35100176位点的CCT碱基插入变异能显著抑制启动子活性，从而影响IPO8基因的转录。

关键词：Importin 8、基因多态性、基因表达

分类号：R363(病理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目No．81060075；No．81260140；江西省教育厅科学研究项目GJJ12683

在线出版日期：2014-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1640-1644