美托洛尔抑制NE诱导的大鼠心肌细胞凋亡及缝隙连接蛋白43的磷酸化

摘要：

目的:研究美托洛尔(Meto)对去甲肾上腺素(NE)刺激下乳鼠心肌细胞凋亡及缝隙连接蛋白43(Cx43)磷酸化水平的影响.方法:新生SD乳鼠心肌细胞分为5组:(1)对照组(Con组,n=6);(2) NE组(n=6):在细胞中加入0.1 μmol/L NE孵育24 h;(3) NE+Meto组(n=6):细胞中同时加入0.1 μmol/L NE和0.1 μmol/L Meto孵育24 h;(4)NE+Meto+ PD98059组(n=6):细胞中提前30 min加入ERK磷酸化抑制剂10 μmol/L PD98059,后同时加入0.1 μmol/L NE和0.1 μmol/L Meto孵育24 h;(5)NE+PD98059组(n=6):细胞中提前30 min加入10 μmol/L PD98059,后加入0.1 μmol/L NE孵育24 h.24 h后计算各组心肌细胞搏动频率,MTT法检测细胞活性,RT-PCR检测各组心肌细胞Cx43 mRNA表达,采用 Western bloting法检测各组心肌细胞p-Cx43、p-ERK1/2和活化caspase-3蛋白表达.结果:(1)NE单独处理可显著增高心肌细胞搏动频率和降低心肌细胞活性,Meto阻断则可显著降低心肌细胞搏动频率和显著提高细胞活性;而PD98059单独处理则对心肌细胞搏动频率无明显影响,但PD98059处理后可在一定程度上抑制Meto提高细胞活性的作用.(2)与Con组比较,NE单独处理可显著上调心肌细胞Cx43 mRNA表达(P<0.01);而与NE组比较,Meto(P<0.01)或PD98059(P<0.01)的单独干预均可显著抑制Cx43 mRNA的表达,且Meto和PD98059两者共处理心肌细胞可进一步抑制NE上调Cx43 mRNA表达的作用(P<0.01).(3)与NE组比较,Meto可显著抑制NE诱导的心肌细胞p-Cx43、p-ERK1/2和活化caspase-3表达增加(P<0.01),PD98059和Meto两者共处理后可进一步增强Meto对p-Cx43、p-ERK1/2和活化caspase-3表达的抑制(P<0.01);而PD98059单独处理对NE诱导的心肌细胞p-Cx43和活化caspase-3表达增加则无显著影响(P>0.05).结论:美托洛尔对NE诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用与其独特的Cx43磷酸化抑制作用有关,该作用可能部分经由ERK1/2通路介导.

关键词：乳鼠心肌细胞、美托洛尔、去甲肾上腺素、缝隙连接蛋白43

所属期刊栏目：29

分类号：R541.6(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：广东省医学科研基金资助A2013251;广州市科技计划2010Y1-C941;广州市医药卫生科技项目20131A011142

在线出版日期：2014-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2024-2029