抑制小鼠HL-1心肌细胞桥粒斑蛋白基因表达对缝隙连接蛋白43结构和功能的影响

摘要：

目的:采用基因沉默技术抑制小鼠HL-1心肌细胞桥粒斑蛋白(DSP)基因表达以明确DSP与缝隙连接蛋白43(Cx43)的结构和功能关系.方法:用基因沉默技术抑制DSP基因的表达,Western blotting和流式细胞术检测HL-1细胞DSP和Cx43蛋白的表达,用双免疫荧光方法检测DSP与Cx43蛋白的表达与定位情况,并用划痕标记染料示踪技术检测细胞缝隙连接通讯状况.结果:与空白组和对照组相比,siRNA-DSP组的DSP和Cx43蛋白表达量降低(P＜0.05).免疫荧光检测发现空白组和对照组DSP与Cx43蛋白存在共定位情况,而siRNA-DSP组DSP和Cx43蛋白共定位遭到破坏,Cx43蛋白出现再分布,在细胞内检测到Cx43蛋白,并且划痕标记染料示踪技术检测发现siRNA-DSP组Lucifer yellow通过HL-1细胞缝隙连接的传输功能降低.结论:DSP表达抑制不仅使Cx43出现再分布,而且影响缝隙连接传导功能.

关键词：缝隙连接蛋白43、桥粒斑蛋白、基因沉默、HL-1细胞

所属期刊栏目：29

分类号：R542.2(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：广东省自然科学基金资助项目10151008002000011

在线出版日期：2013-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：982-987