NOD8对LPS诱导巨噬细胞释放NO、TNF-α和IL-1β的影响

摘要：

目的:探讨NOD8对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞释放一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的影响.方法:pEGFP-C2及pEGFP-NOD8重组质粒分别转染小鼠巨噬细胞RAW264.7,以LPS刺激RAW264.7细胞0、6、12、24h后,采用Griess reagent法测定观察细胞分泌的NO水平；ELISA法检测IL-1β和TNF-α的含量；荧光法测定活化的caspase-1水平；Western blotting检测NOD8蛋白表达及NF-κB p65亚基的核转位情况.结果:(1)与转染pEGFP-C2空质粒组比较,转染pEGFP-NOD8质粒组NOD8蛋白表达明显增加.(2)LPS刺激6、12、24h后,RAW264.7细胞释放NO、IL-1β及TNF-α均明显增加；而在pEGFP-NOD8+LPS组RAW264.7细胞,NO于12、24h的释放显著降低,IL-1β于6、12、24h的释放也明显降低,TNF-α的释放则无明显变化.(3)在LPS刺激6、12、24h后,RAW264.7细胞caspase-1活化水平均明显升高,胞浆NF-κB p65亚基表达明显减少,表明p65核转位增加；而pEGFP-NOD8+ LPS组可显著抑制caspase-1的活化以及NF-κB p65亚基的核转位,差异有统计学意义.结论:NOD8可抑制LPS诱导的巨噬细胞NO与IL-1β释放,其作用机制可能与NOD8抑制caspase-1及NF-κB的活化有关.

关键词：RAW264.7细胞、脂多糖类、NOD8蛋白、核因子κB、一氧化氮、白细胞介素1β

所属期刊栏目：29

分类号：R329.21(人体形态学)

资助基金：广东省自然科学基金资助项目S2012010008161;暨南大学"211工程"三期预研项目;广东省高等学校自然科学重点研究项目05Z002

在线出版日期：2013-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：889-894