组蛋白的制备及其对巨噬细胞的影响

摘要：

目的:用不同方法制备组蛋白并观察组蛋白在体外对巨噬细胞活力及细胞因子释放的影响.方法:用基因克隆的方法构建组蛋白H3和H4的原核表达质粒,分别表达和纯化带谷胱甘肽S-转移酶(GST)和组氨酸(His)标签的组蛋白(GST-H3、GST-H4、His-H3和His-H4)；用高盐法提取真核细胞(RAW264.7和293F细胞)组蛋白；用上述不同来源组蛋白(7.5 ～50 mg/L)刺激巨噬细胞4h,利用MTT和流式细胞术检测巨噬细胞活力；用液相芯片方法检测不同来源组蛋白对巨噬细胞释放在培养上清中的细胞因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度.结果:His-H3/H4和真核细胞来源的组蛋白明显降低细胞活性,诱导RAW264.7细胞发生晚期凋亡和坏死；不同来源组蛋白对RAW264.7细胞释放IL-6和TNF-α均有不同程度的促进作用.结论:原核表达His-H3、His-H4及真核细胞提取的组蛋白均可抑制巨噬细胞活力,诱导巨噬细胞发生晚期凋亡和坏死.组蛋白可能通过促进炎症细胞因子的释放参与了炎症反应过程.

关键词：原核蛋白表达、组蛋白类、巨噬细胞

所属期刊栏目：29

分类号：Q256(细胞生理学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划项目2010CB529704;国家自然科学基金资助项目81272149,81072425

在线出版日期：2013-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：883-888