MicroRNA-29a对大鼠心肌细胞Bcl-2和Mcl-1表达的调控作用及其机制

摘要：

目的:探讨microRNA-29a(miR-29a)对大鼠心肌细胞(CM细胞)B细胞白血病/淋巴瘤-2(Bcl-2) 和髓样细胞白血病-1(Mcl-1)表达的调控机制.方法:体外培养新生Sprague-Dawley大鼠CM细胞和人胚肾细胞株293T.合成大鼠miR-29a的拟似物(mimic)和抑制剂(inhibitor).用脂质体Lipofectamine RNAiMAX转染miR-29a mimic进入CM细胞,转染 48 h后分别用实时荧光定量PCR和Western blotting检测Bcl-2和Mcl-1 mRNA和蛋白的表达变化.构建Bcl-2 和Mcl-1 的萤光素酶报告基因载体(DNA质粒),转染293T 细胞(DNA质粒和miRNA共转染)和CM细胞(miRNA和 DNA 质粒先后转染),双萤光素酶报告基因系统检测萤光素酶的表达变化.结果:CM细胞转染miR-29a mimic 48 h后,Bcl-2 和Mcl-1 mRNA和蛋白的水平均下调 (P<0.05).双萤光素酶报告基因系统显示,在293T细胞中,miR-29a可特异抑制带有 bcl-2和mcl-1 3'UTR上野生型识别元件的报告基因表达(P<0.05),在CM细胞中,抑制内源性的miR-29a水平能促进bcl-2和mcl-1 3'UTR上野生型识别元件的报告基因表达.结论:抗凋亡基因bcl-2和mcl-1是miR-29a的靶基因.miR-29a可能通过作用于Bcl-2和Mcl-1实现对心肌细胞凋亡的调控作用,具体效应仍待进一步阐明.

关键词：MicroRNA-29a、细胞凋亡、B细胞白血病/淋巴瘤-2、髓样细胞白血病-1

所属期刊栏目：28

分类号：R363(病理学)

资助基金：广东省自然科学基金资助项目9151052002000006;国家自然科学基金青年项目81201453;广州市医药卫生科技项目201102A213020

在线出版日期：2012-12-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1928-1932