10.3969/j.issn.1000-4718.2011.09.039
变性高效液相色谱技术定量检测急性髓细胞白血病FLT3基因内部串联重复突变方法学的建立
目的:建立一种应用变性高效液相色谱技术(DHPLC)相对定量检测急性髓细胞白血病(AML)患者Fms样酪氨酸激酶3(FLT3)基因的内部串联重复(ITD)突变的方法.方法:根据FLT3-ITD突变基因多位于14外显子而设计引物,用聚合酶链反应(PCR)方法特异性扩增121例AML患者FLT3-ITD突变基因,再用DHPLC技术相对定量检测FLT3-ITD等位基因突变的情况;与毛细管电泳法(CE)检测突变的结果对比进行该方法的有效性检验;最后与121例样品PCR扩增产物的测序结果进行对比.结果:经DHPLC分析后均能得到特征性的洗脱峰.121例样本中检测到FLT3-ITD突变阳性的样本13例,总阳性率为10.7%,阳性突变等位基因的比例不一,分布范围中位数为34.5%(11.4%-80.2%),为21-87 bp单个插入片段.阳性率和突变比例与CE方法检测结果相比较均无显著差异(P>0.05),并与121例样本FLT3-ITD扩增PCR产物基因测序结果一致.结论:成功建立了一种应用DHPLC相对定量检测AML患者FLT3-ITD基因突变的方法.
变性高效液相色谱、白血病、髓样、急性、Fms样酪氨酸激酶、3、内部串联重复、基因
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R733.71(肿瘤学)
2011-11-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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