机械牵张诱导THP-1细胞高迁移率族蛋白B1移位出核

摘要：

目的:探讨机械牵张对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在THP-1细胞内移位的影响.方法:构建HMGB1-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白的真核表达载体.通过两步亚克隆的方法,将HMGB1和EGFP的编码序列以融合蛋白的形式克隆到pcDNA3-HA载体上,随后转染THP-1细胞并施加机械牵张应变,荧光显微镜观察HMGB1在细胞内的表达及移位情况.结果:重组质粒经酶切鉴定证明构建正确,并在THP-1细胞中大量表达.荧光显微镜观察发现,HMGB1-EGFP融合蛋白主要分布于细胞核,经机械牵张18 h,可见细胞中融合蛋白从细胞核移位到细胞质,在细胞浆中观察到明显的绿色荧光.结论:成功构建了HMGB1-EGFP融合蛋白,在THP-1细胞中观察到机械牵张可诱导HMGB1移位出核.

关键词：机械牵张、高迁移率族蛋白质类、THP-1细胞

所属期刊栏目：27

分类号：R329.2;R563(人体形态学)

资助基金：广东省科技计划资助项目2010B031600011;广东省医学科研基金资助项目A2009497;广州市医药卫生科技一般引导项目2009-YB-021;广州市医药卫生科技重点资助项目2008-ZDi-14

在线出版日期：2011-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：382-385