悬滴培养诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞

摘要：

目的:与平板培养比较,探讨悬滴三维培养对大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)肝样分化的诱导效应.方法:对rMSCs进行悬滴培养,以肝细胞生长因子(HGF)作为诱导因子,同时设定平板培养诱导和非诱导对照组,在培养第7、14和21 d后,通过RT-PCR法和免疫荧光技术检测白蛋白(ALB)、甲胎蛋白(APF)和角蛋白(CK-18)在mRNA和蛋白水平上的表达情况,并通过ELISA检测培养液上清中ALB的分泌.结果:HGF悬滴培养的rMSCs形成球状三维结构,内部呈现空囊样结构,大量细胞聚集在球体外侧面;在第7 d就出现ALB和CK-18的强阳性表达,而AFP则表达较弱.HGF培养的单层rMSCs直到第14 d才出现ALB、AFP和CK-18 mRNA的弱阳性表达,蛋白表达则在第21 d才呈现阳性.ELISA检测到HGF悬滴培养后rMSCs能够胞外分泌ALB,与正常和平板培养诱导组比较差异显著(P< 01).结论:悬滴培养为rMSCs创造一种球形三维培养微环境,在HGF的诱导作用下,rMSCs横向分化为肝样细胞.

关键词：骨髓间充质干细胞、悬滴培养、肝细胞生长因子、肝样细胞

所属期刊栏目：26

分类号：Q254(细胞生理学)

资助基金：教育部新世纪优秀人才支持计划资助项目NCET-08-0611;中国博士后科学基金资助项目20090450882;广州市科技攻关计划-科技攻关引导资助项目2007Z3-E0641

在线出版日期：2010-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2207-2211