肝癌Bel7402细胞HLA-E基因上调对NK细胞体外杀伤作用的影响

摘要：

目的:探讨肝癌Bel7402细胞人类白细胞抗原-E(HLA-E)基因上调对NK细胞体外杀伤作用的影响.方法:体外构建Lentivirus/CMV/GFP-HLA-E慢病毒表达载体并转导肝癌Bel7402细胞,采用RT-PCR和Western blotting方法检测肝癌Bel7402细胞HLA-E基因mRNA水平和蛋白水平的表达,分析肝癌Bel7402细胞HLA-E基因上调及HLA-ABC抗体封闭靶细胞相应位点对NK细胞体外杀伤作用的影响.结果:Lentivirus/CMV/GFP-HLA-E重组慢病毒载体感染Bel7402细胞后不同时段(24 h、48 h、72 h、96 h)的HLA-E mRNA的表达明显上调,除在感染后24 h(P＜0 05)外,慢病毒过表达组在感染后48 h、72 h、96 h与Bel7402组比较,显著差异 (P＜0 01).蛋白水平的表达亦明显上调:24 h、48 h、72 h、96 h外源性/内源性HLA-E吸光度比值与12 h比较显著差异 (P＜0 01).未封闭的Bel7402组和Bel7402 Lenti HLA-E组比较,NK细胞的杀瘤活性差异显著(P＜0 05或P<0 01);封闭组和未封闭组比较,NK细胞的杀瘤活性差异显著(P＜0 05);Bel7402(封闭组) 和Bel7402 Lenti HLA-E(封闭组)比较,NK细胞的杀瘤活性有显著差异(P＜0 01).结论:Lentivirus/CMV/GFP-HLA-E慢病毒表达载体能有效增加HLA-E的表达.NK细胞对HLA-E基因表达上调的Bel7402细胞的靶杀伤作用降低;抗HLA-ABC单抗封闭靶细胞相应位点后,NK细胞对靶细胞的杀伤能力普遍有所提高.

关键词：人白细胞抗原E、癌、肝细胞、基因表达、自然杀伤细胞

所属期刊栏目：26

分类号：R730.5(肿瘤学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划资助项目973分课题2009CB522404;国家自然科学基金资助项目30571769;十一五科技攻关资助项目2008ZX10002-025;广东省科技计划资助项目2009A030200006;广东省自然科学基金博士启动资助项目10451130001004472

在线出版日期：2010-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2081-2085