蛋白酶体抑制剂对神经细胞nicastrin表达的影响

摘要：

目的:探讨蛋白酶体抑制剂能否引起神经细胞内nicastrin(NCT)蛋白表达及分布的变化,以明确NCT的蛋白降解是否与蛋白酶体有关.方法:在用人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)建立稳定表达NCT细胞株的基础上,应用蛋白酶体抑制剂处理NCT细胞株,并结合Western blotting、放射性同位素脉冲示踪技术、免疫荧光双标技术,检测蛋白酶体抑制剂处理后神经细胞内NCT的蛋白表达变化.结果:Western blotting结果显示,特异性蛋白酶体抑制剂处理后,神经细胞内源性和外源性转染的NCT的表达显著增强,高度特异的蛋白酶体抑制剂lactacystin对NCT蛋白的增强效应呈剂量依赖性和时间依赖性;放射性同位素脉冲示踪结果显示,蛋白酶体抑制剂可显著增强细胞内新合成的NCT蛋白的表达水平,其增强作用是通过阻止[35S]-NCT的蛋白降解来实现的;免疫荧光双标结果提示,NCT与泛素在细胞内共存.结论:神经细胞内NCT的降解由蛋白酶体途径介导;NCT在降解之前经泛素化修饰.

关键词：Nicastrin、蛋白酶体抑制剂、神经元

所属期刊栏目：26

分类号：R749.1(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30700885;教育部重点项目资助计划209102;重庆市首届优秀人才资助项目渝教人[2009]2号;重庆市教委资助项目KJ090328

在线出版日期：2010-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1085-1090