iASPP对表达野生型p53基因的乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的影响

摘要：

目的:P53凋亡刺激蛋白(ASPP)家族成员能够调节P53诱导的细胞凋亡.其中ASPP家族抑制成员(iASPP)主要通过特异性地和P53蛋白结合抑制肿瘤细胞的凋亡,本实验通过构建iASPP的RNAi质粒,研究在体内外抑制iASPP基因后对表达野生型p53基因的乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响.方法:采用分子生物学方法构建iASPP的腺病毒RNAi质粒pAd-iASPP-RNAi;体外转染MCF-7细胞,同时建立MCF-7细胞的裸鼠移植瘤模型;分别采用RT-PCR和Western blotting检测转染后瘤细胞iASPP mRNA和蛋白质表达的变化;采用流式细胞术检测转染前后瘤细胞凋亡的变化.结果:转染iASPP RNAi后,MCF-7细胞的iASPP mRNA及蛋白表达量降低(抑制率分别为95.4%和96.8%,P<0.01);MCF-7细胞的凋亡百分率、坏死百分率与对照组相比具有显著差异(P<0.01).裸鼠移植瘤模型经pAd-iASPP-RNAi处理后,iASPP mRNA及蛋白表达量也明显降低(抑制率分别为87.4%和89.2%,P<0.01);移植瘤细胞的凋亡百分率和坏死百分率显著上升(P<0.01和P<0.05).结论:在体内外抑制iASPP基因的表达能够通过p53途径诱导表达野生型p53的乳腺癌细胞凋亡.

关键词：蛋白质iASPP、MCF-7细胞、基因、p53、RNA干扰

所属期刊栏目：26

分类号：R33;R73.354(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30672299

在线出版日期：2010-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：282-286