ET-1介导损伤气道上皮诱导成纤维细胞活化的信号机制

摘要：

目的:探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K/Akt)在内皮素(ET)-1介导损伤气道上皮诱导上皮下成纤维细胞活化过程中的作用及对白细胞介素(IL)-6的影响.方法:将正常或经多聚左旋精氨酸(PLA)刺激的人气道上皮细胞与原代气道成纤维细胞共培养并分别加入p38 MAPK、PI3K特异性抑制剂SB203580、LY294002或ET受体A阻断剂BQ123,应用免疫组化、免疫印迹技术或ELISA检测成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达、p38 MAPK、Akt的活化及成纤维细胞上清IL-6水平;制备成纤维细胞胶原凝胶并与不同方法处理的上皮细胞共培养,测量各组凝胶面积变化以了解上皮细胞对成纤维细胞收缩反应的诱导及其上述处理因素的影响.结果:与损伤上皮细胞共培养的成纤维细胞上清中ET-1、IL-6水平[(13.69±1.36) ng/L、(56.7±10.7) ng/L]明显高于与正常上皮细胞共培养的成纤维细胞上清[(3.79±0.64) ng/L、(15.5±3.2)ng/L],BQ123、SB203580或LY294002皆不同程度减弱损伤上皮细胞诱导的IL-6释放[分别为(27.2±3.1) ng/L、(31.5±3.6) ng/L、(41.3±3.2) ng/L];成纤维细胞与损伤气道上皮细胞共培养后p38 MAPK、Akt先后激活,BQ123减弱磷酸化p38 MAPK、Akt水平,SB203580浓度依赖性减弱Akt磷酸化水平,而LY294002对磷酸化p38 MAPK水平影响很小.与损伤气道上皮细胞共培养后成纤维细胞α-SMA表达增加,并且胶原收缩百分比明显大于与正常气道上皮共培养的成纤维细胞[(61.2±2.7)% vs (15.4±7.3)%];BQ123、SB203580及LY294002皆不同程度减弱成纤维细胞α-SMA表达与凝胶收缩且BQ123、SB203580抑制凝胶收缩作用较LY294002更明显.结论:ET-1通过激活p38 MAPK、PI3K/Akt信号通路并促进IL-6分泌在损伤气道上皮诱导成纤维细胞活化过程中发挥关键作用.

关键词：内皮缩血管肽1、气道上皮细胞、成纤维细胞、p38MAPK、PI3K/Akt信号通路

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分类号：R562.2~+5(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：安徽省高校省级自然科学研究基金资助项目200713211;皖南医学院博士科研启动资助项目

在线出版日期：2010-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2403-2407