RNAi沉默Beclin 1基因对维生素K3损伤人肝癌细胞SMMC-7721的影响

摘要：

目的:探讨应用RNAi技术沉默Beclin 1基因对维生素(vitamin K3,VitK3)引起的人肝癌SMMC-7721细胞损伤的影响.方法:应用真核细胞转染技术将Psilencer 3.1-siRNA-Beclin 1重组质粒转入人肝癌SMMC-7721细胞,同时分别设立转染空质粒阴性对照组和转染试剂阴性对照.于48 h后收集细胞,分别提取细胞总RNA及总蛋白,通过RT-PCR和Western blotting检测Beclin 1基因表达.应用40 μmol/L Vit K3作用Beclin 1-siRNA细胞株,Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率.结果:与对照组相比,siRNA重组质粒明显降低Beclin 1mRNA水平,抑制其蛋白表达.40 μmol/L Vit K3作用人肝癌SMMC-7721细胞Beclin 1 mRNA表达明显高于对照组,细胞凋亡率增加(P<0.01);而Beclin 1-siRNA细胞株,Beclin 1 mRNA表达显著低于对照组,与40 μmol/L VitK3作用组相比细胞凋亡率显著增加(P<0.01).结论:Psilencer 3.1-siRNA-Beclin 1转染人肝癌SMMC-7721细胞后,可有效抑制Beclin-1 mRNA和蛋白的表达,抑制Vit K3引起的Beclin 1依赖性细胞自噬信号通路的激活,促进细胞凋亡.

关键词：RNA干扰、基因、Beclin 1、自吞噬作用、细胞凋亡、维生素K3、SMMC-7721细胞

所属期刊栏目：25

分类号：R730.23(肿瘤学)

资助基金：吉林省科技厅发展计划资助项目200705373

在线出版日期：2009-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1288-1291