NK4基因的克隆及其在Raji细胞中的表达

摘要：

目的:克隆NK4基因,构建其重组真核表达载体,并观察其在Raji细胞中的表达.方法:从人肝组织中提取总RNA,行RT-PCR获得NK4基因cDNA,与载体pVITRO2-mcs构建重组真核表达载体,转染Raji细胞.潮霉素B筛选后,采用实时荧光定量PCR、ELISA、细胞免疫组化和半固体培养等方法检测NK4基因在Raji细胞的表达,筛选稳定表达的细胞株.结果:NK4基因获成功克隆并构建了重组真核表达载体pVITRO2-mcs-NK4;转染NK4基因后的Raji细胞经RT-PCR发现存在特异性DNA片段.NK4基因在Raji细胞可稳定表达NK4 mRNA和蛋白,且可抑制Raji细胞的增殖、迁徙和侵袭.结论:NK4基因成功克隆并构建了重组真核表达载体,转染Raji细胞后表达稳定.

关键词：基因、NK4、克隆、基因表达、Raji细胞

所属期刊栏目：25

分类号：R363(病理学)

资助基金：浙江省医药卫生科学基金资助项目003B172,2007A175;宁波市医药卫生科学基金资助项目2003079;宁波市科技计划资助项目2007C10065

在线出版日期：2009-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：970-975