10.3321/j.issn:1000-4718.2009.03.003
血管紧张素Ⅱ 1型受体牵张激活位点的筛选
目的:寻找血管紧张素Ⅱ 1型受体(angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1受体)上的机械负荷感受位点.方法:制备AT1受体不同位点的突变体,转染既不表达血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, AngⅡ)也不表达AT1的COS7细胞,Western blotting法检测细胞牵张后细胞外信号调节激酶(ERKs)的磷酸化水平.结果:构建了C76A、K199Q、H256A、Q257A、C289A、C296A、K199Q/H256A、K199Q/Q257A 8种突变体.COS7细胞转染AT1受体以前, AngⅡ和牵张刺激都不能引起细胞内ERKs磷酸化升高;而转染野生型AT1后,AngⅡ和牵张刺激引起细胞内ERKs磷酸化明显升高,各突变体中,Q257A和C289A转染细胞后细胞对牵张刺激的反应受到明显抑制,提示AT1的牵张感受位点在Q257A和C289A.结论:结果提示AT1受体上位于257位的谷氨酰胺和289位的胱氨酸在机械牵张引起的AT1受体激活中起了重要作用.
受体、血管紧张素、牵张感受器、COS7细胞
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R363(病理学)
国家杰出青年科学基金资助项目30525018;上海市优秀学科带头人资助项目05XD14003;国家自然科学基金资助项目30670840;教育部博士点基金资助项目20060246079;国家重点基础发展规划项目2007CB512003
2009-05-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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