CHK1shRNA抑制HeLa细胞增殖并诱导其凋亡

摘要：

目的:构建针对CHK(checkpoint kinase,细胞周期检测点激酶)1基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA),观察其对高表达CHK1的宫颈癌细胞系-HeLa细胞凋亡和细胞周期的影响.方法:设计并合成了针对CHKI的shRNA,将其导入本室构建的携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的RNAi(RNA interference,RNA干扰)表达载体中.通过RT-PCR和Western blotting分别检测HeLa细胞CHKI基因和蛋白水平的表达,以流式细胞仪测细胞凋亡,MTT法检测细胞的增殖.结果:成功构建了携带EGFP的RNAi表达载体pEGFP-HI.与对照组和空载体转染组相比.shRNA使细胞中CHK1 mRNA水平下降了66%,蛋白水平下降了印%.此外,shRNA转染组的HeLa细胞凋亡率明显高于对照组,其增殖活性则明显低于对照组.结论:本课题构建的RNAi表达载体便于观察靶基凶的转染情况,且不影响H1启动子的体内转录.CHK1shRNA能诱导HeLa细胞凋亡,抑制该细胞的增殖,为进一步研究CHK1在肿瘤治疗中的作用机制提供了实验基础.

关键词：检测点激酶1、RNA干扰、HeLa细胞、细胞凋亡

所属期刊栏目：24

分类号：R347(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30240022

在线出版日期：2009-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1891-1894