人支气管上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合酶催化亚单位基因转录的调控

摘要：

目的:研究人支气管上皮细胞谷胱甘肽(GSH)合成的限速酶γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)催化亚单位(GCLC)基因转录调控.方法:通过PCR的方法克隆GCLC基因的部分转录调控区基因,构建表达虫荧光素酶报告基因的质粒;采用外切核酸酶Ⅲ结合S1核酸酶的方法构建了GCLC基因部分转录调控区基因的嵌套缺失体;基因转染上述质粒,通过虫荧光素酶报告基因的表达分析揭示嵌套缺失体突变基因的转录调控功能.结果:人GCLC基因转录起始位点上游-2 515～-2 236 bp、-864～-838 bp、-769～-538 bp、-421～-341 bp区间的转录调控区为正性转录调控区,为新发现的转录调控区域;而-810～-769 bp区间特别是-782～-769 bp区间为负性转录调控区,它的定位范围较原来更精确.结论:本研究有助于进一步深入探讨人支气管上皮细胞GCLC基因的转录调控,为γ-GCS及GSH的合成调控研究提供了良好的前期实验基础.

关键词：基因、转录调控、谷胱甘肽

所属期刊栏目：24

分类号：R56(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：广东省自然基金团队资助项目05200239

在线出版日期：2008-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1543-1548