人端粒酶hTERT可诱导RNAi系统的建立及其对TREx-HeLa细胞生长的影响

摘要：

目的:建立可诱导性沉默hTERT的RNA干扰系统,并初步探讨端粒酶与细胞增殖调控之间的关系.方法:构建沉默端粒酶催化亚基hTERT的Tet-on可诱导性RNAi载体psiRNA-hH1/TO-hTERTshRNA,并稳定转染表达TR的TREx-HeLa细胞,用半定量RT-PCR检测hTERT的转录后水平,TRAP法检测端粒酶活性.MTT法检测细胞的增殖,流式细胞仪和Hoechst33342染色法观察细胞凋亡.结果:构建了可诱导性沉默端粒酶催化亚基hTERT的重组体psiRNA-hH1/TO-hTERTshRNA,并建立了可诱导性沉默hTERT的TREx-HeLa细胞株.短期内的端粒酶活性降低后TREx-HeLa细胞生长增殖有下降趋势,而其凋亡情况则未见明显变化.结论:本研究建立了可诱导沉默hTERT的RNAi系统,为研究端粒酶活性与细胞增殖和衰老的关系提供了实验基础.

关键词：RNA干扰、四环素可诱导RNAi系统、端粒、末端转移酶、细胞凋亡、TREx-HeLa细胞

所属期刊栏目：24

分类号：R363(病理学)

资助基金：广东省自然科学基金04105351;广东省科技厅科技计划2006B35502007

在线出版日期：2008-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：537-542