增殖细胞核抗原siRNA序列的设计、合成与筛选

摘要：

目的:设计并筛选能有效抑制人肝癌SMMC-7721细胞、人结肠癌Caco2细胞、人胃癌SCG-7901细胞增殖的增殖细胞核抗原(PCNA)siRNA.方法:总结以往提出的siRNA设计原则的基础上,设计4条PCNA siRNA,体外转录合成PCNA siRNA;并作用于3种肿瘤细胞,WST-8法检测细胞增殖活性,筛选能有效抑制肿瘤细胞增殖的siRNA序列;RT-PCR检测细胞PCNA mRNA水平;免疫细胞化学方法检测PCNA蛋白表达水平.结果:4条PCNA siRNA中,有3条序列(No.2、No.4、No.3)的siRNA能有效抑制3种肿瘤细胞的增殖;其中No.2、No.4作用效果最优,以50 nmol/L浓度作用48 h,对3种肿瘤细胞的增殖抑制率均可达到62%以上,No.2、No.4 PCNA siRNA均能在mRNA和蛋白水平显著下调PCNA的表达.结论:PCNA siRNA能在体外有效抑制SMMC-7721细胞、Caco2细胞、SCG-7901细胞的增殖,其适宜作用浓度为50 nmol/L,适宜作用时间为48 h.

关键词：增殖细胞核抗原、siRNA、结直肠肿瘤、肝肿瘤、胃肿瘤

所属期刊栏目：24

分类号：R73-36+2(肿瘤学)

资助基金：广东省广州市科技计划2002J1-C0361;广东省医学科学技术研究基金A2006352

在线出版日期：2008-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：484-489