siRNA电转化幽门螺杆菌抑制空泡毒素基因mRNA表达

摘要：

目的:利用RNA干扰(RNAi)技术原理,优化小分子干扰RNA(siRNA)电转化幽门螺杆菌(Hp)的条件,并观察电转化后空泡毒素基因(VacA)的mRNA表达是否受到抑制.方法:合成5对特异siRNA为实验组:S1、S2、S3、S4、S5,1对非特异siRNA为对照组:S6.设定不同的电场强度及脉冲时间,探索电转化Hp的最佳条件,并观察转化效率和电转化后Hp存活率.在最佳电转化条件下将上述6对siRNA转化Hp,在不同时点通过RTPCR方法检测VacA mRNA的抑制率.结果:电场强度和脉冲时间是影响电转化效率的2个关键因素,在25 kV/cm电场强度下脉冲6ms时,电转化效率最高达91%,S2、S4组在转化后VacA mRNA抑制率分别为65%和77%.结论:适当的场强和脉冲时间的组合可使转化效率达到最大值.靶向siRNA可以抑制Hp VacA的mRNA表达.

关键词：电转化、螺杆菌、幽门、RNA干扰、基因、VacA

所属期刊栏目：23

分类号：R363(病理学)

资助基金：国家自然科学基金30271276;广东省自然科学基金5001785;广东省自然学基金04300330

在线出版日期：2008-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2244-2247