稳定表达UT-A2的FRT细胞系的建立与鉴定

摘要：

目的:建立稳定表达尿素通道蛋白A2(UT-A2)的FRT细胞系,为寻找UT-A2抑制剂提供细胞模型.方法:通过真核表达质粒-脂质体介导的方法,将UT-A2 cDNA与真核表达载体pUB6/V5连接后的重组质粒转染人FRT细胞,经稳定筛选建立稳定表达UT-A2的FRT细胞系.功能检测实验将细胞分为对照组和稳定转染组,用2 mol/L尿素负荷试验检测稳定表达UT-A2的FRT细胞膜的尿素通透性.结果:经BSD筛选21 d后得到稳定表达UT-A2的细胞株; Western blotting证实UT-A2蛋白稳定表达; 免疫荧光分析结果提示UT-A2的质膜定位.2 mol/L尿素试验证实了该细胞系具有明显尿素通透性.结论:在非肾脏上皮细胞获得了稳定质膜定位表达UT-A2的FRT细胞株,该细胞株可用于UT-A2抑制剂的筛选.

关键词：尿素通道蛋白、转染、尿素

所属期刊栏目：23

分类号：R363(病理学)

资助基金：国家自然科学基金30370572

在线出版日期：2007-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：803-806