Norrin基因对人视网膜微血管内皮细胞增殖和周期的影响

摘要：

目的:体外培养并鉴定人视网膜微血管内皮细胞(HRCECs),并探讨Norrin基因高表达对HRCECs增殖和周期的影响.方法:体外分离、培养并鉴定人视网膜微血管内皮细胞,抗第Ⅷ因子相关抗原抗体鉴定细胞.利用脂质体lipofectamine 2000将AP-3myc-hNorrin/pRK5质粒转染HRCECs,RT-PCR、免疫组化和Western blotting方法检测Norrin/myc的表达确定转染效率.采用MTT法测定转染后细胞的增殖能力,流式细胞术分析其细胞周期变化.结果:所培养的细胞第Ⅷ因子相关抗原免疫组化为强阳性.AP-3myc-hNorrin/pRK5质粒转染后24 h,RT-PCR显示实验组Norrin表达水平明显高于阴性对照组(P＜0.01).转染后48h免疫组化及Western blotting均显示实验组细胞Myc表达强于阴性对照组.MTT法显示细胞增殖高于对照组,细胞周期检测示实验组G2期细胞高于阴性对照组,P＜0.01.结论:脂质体能成功转染AP-3myc-hNorrin/pRK5进入HRCECs.Norrin高表达能促进HRCECs的增殖,并促进细胞DNA合成,提示Norrin在视网膜血管生成过程中可能具有重要作用.

关键词：基因、Norrin、视网膜血管、细胞增殖、细胞周期

所属期刊栏目：23

分类号：R363(病理学)

资助基金：广东省自然科学基金05001786

在线出版日期：2007-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：639-643