肝脏特异性表达载体Kbpala/Alb-ATP7B的构建及表达

摘要：

目的:构建小鼠白蛋白启动子引导下携带野生及常见突变型Arg778Leu、His1069Gln的人ATP7B cD-NA的肝脏特异性表达载体Kbpala/Alb-ATP7B,并检测其表达情况.方法:定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及His1069Gln两种ATP7B突变体,定向克隆将小鼠白蛋白启动子Alb序列及野生和突变的ATP7B cDNA依次亚克隆至转基因载体Kbpala上,得到可在肝脏特异性表达的正常及突变型人ATP7B的转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B.将其短暂转染BRL细胞及BHK细胞,通过Western blotting检测其蛋白表达情况.结果:经酶切鉴定及定点测序证实,转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B构建成功;Western blotting显示仅在肝脏细胞实现表达.结论:带有人类ATP7B cDNA的野生及常见致病突变型的转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B构建成功并在肝脏细胞特异性表达.

关键词：白蛋白类、启动子、肝豆状核变性、基因表达

所属期刊栏目：22

分类号：R742.4(神经病学与精神病学)

资助基金：国家"211"工程建设项目98138;广东省科技厅资助项目9827830

在线出版日期：2006-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1045-1048