脂肪分化相关蛋白反义寡核苷酸降低乙酰辅酶A: 胆固醇酰基转移酶活性

摘要：

目的:已经发现随着细胞内胆固醇酯的积聚,脂肪分化相关蛋白的表达明显增加.本文进一步探讨脂肪分化相关蛋白干预细胞内胆固醇代谢的作用位点.方法:Ox-LDL组为80 mg/L氧化低密度脂蛋白与C57BL/6J小鼠腹腔巨噬细胞共同孵育,Ox-LDL+antisense组另加1 mmol/L脂肪分化相关蛋白反义寡核苷酸,在不同的时点取样,共观察4 d.使用荧光分光光度计观察细胞内胆固醇酯的改变;使用脂肪分化相关蛋白抗体间标法结合流式细胞术,观察脂肪分化相关蛋白表达量的变化;使用Ox-r[CL-3H]LDL和液体闪烁计数器观察细胞对氧化低密度脂蛋白摄入量的变化,并同时测定乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶的活性.结果:72 h后,Ox-LDL+antisense组细胞内胆固醇酯(19.9±1.9)mg/g protein显著低于Ox-LDL组(46.6±3.4)mg/g protein.4 d观察期间,脂肪分化相关蛋白蛋白的表达量两组细胞都增加,从12 h时点开始,Ox-LDL组大于Ox-LDL+antisense组,在4 d时点,Ox-LDL组明显高于Ox-LDL+antisense组.两组细胞摄入Ox-r[CL-3H]LDL的量逐渐增加,但是,Ox-LDL+antisense组摄入量从1 d后明显低于Ox-LDL组,在2 d和4 d时点,两组差别仍有显著性.乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶相对活性从6h到2 d表现为增加,在2 d时点,两组比较差别显著,Ox-LDL+antisense组的活性明显低于Ox-LDL组.但从2 d到4 d,乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶相对活性稳定.ACAT的活性与脂肪分化相关蛋白蛋白的表达量相关分析表明,Ox-LDL组R2=0.6176(P＜0.05),Ox-LDL+antisense组R2=0.8212(P＜0.05).结论:抑制脂肪分化相关蛋白表达能引起细胞摄入外源性脂蛋白减少和乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶的活性降低,提示脂肪分化相关蛋白与脂滴的代谢功能密切相关,且乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶有可能是其潜在的位点.

关键词：甾醇O-酰基转移酶、酰基辅酶A、巨噬细胞、胆固醇、寡核苷酸类、反义

所属期刊栏目：22

分类号：R361.3(病理学)

资助基金：湖南省教育厅科研项目01C191

在线出版日期：2006-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：581-585