Fas抗原和caspase-8调控细菌氧化还原蛋白azurin 诱导的人骨肉瘤细胞凋亡的实验研究

摘要：

目的:探讨Fas抗原和caspase-8在细菌氧化还原蛋白azurin诱导人骨肉瘤细胞凋亡中的调控机制及作用.方法:用150 mg/L浓度的azurin处理U2OS细胞,分别作用6、12、24和48h.细胞免疫化学法检测Fas抗原的表达.用荧光试剂盒检测caspase-8的活性.流式细胞仪检测azurin和抗-Fas-抗体诱导的骨肉瘤细胞凋亡百分率,以及加入caspase-8活性抑制剂IETD-FMK后凋亡百分率的变化.结果:Azurin诱导U2OS细胞凋亡后,与对照组比较,Fas抗原表达强度增加(P＜0.01),caspase-8活性升高(P＜0.01).Fas抗原表达和caspase-8活性随着azurin作用时间的延长而逐渐升高,至24h后达到高峰,然后缓慢下降,但仍显著高于对照组(P＜0.01).Fas抗原的表达与caspase-8活性变化呈显著正相关(r=0.873,P＜0.01).表达增强的Fas抗原具有转导凋亡信号的功能,抗-Fas抗体借此增强azurin诱导U2OS细胞凋亡的作用.Caspase-8活性抑制剂IETD-FMK能阻断caspase-8活化而抑制azurin或抗-Fas抗体诱导的U2OS细胞凋亡,与抑制剂组比较,细胞凋亡百分率显著差异(P＜0.01).结论:Fas依赖途径可能为细菌氧化还原蛋白azurin诱导U2OS细胞凋亡主要机制之一,caspase-8活性上调可能在凋亡过程中发挥重要作用.

关键词：阿祖林、骨肉瘤、细胞凋亡、抗原、Fas、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8

所属期刊栏目：22

分类号：R363(病理学)

资助基金：浙江省卫生厅资助项目2003ZD007;浙江省自然科学基金Y204358

在线出版日期：2006-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：486-490