人糖基磷脂酰肌醇(GPI)-B7-1真核表达载体的构建及表达

摘要：

目的:在仓鼠卵巢细胞CHO细胞中高效表达糖基磷脂酰肌醇GPI-B7-1(B7-1即CD80)融合蛋白,获得大量融合蛋白以研究GPI-B7-1在肿瘤治疗中的应用潜力.方法:构建真核表达载体pc3.1/GPI-B7-1,利用脂质体lipofectamine 2000将其转染CHO细胞,G418加压筛选抗性克隆,流式细胞仪检测细胞膜上GPI-B7-1融合蛋白的表达情况,SDS-PAGE、Western blot分析鉴定其免疫活性.结果:真核表达载体转染CHO细胞经G418筛选后,流式细胞分析证实为GPI锚定蛋白,SDS-PAGE在60 kD左右蛋白表达量明显高于对照组,在Western blot在60kD左右有一条强的棕色条带,说明GPI-B7-1在CHO中得到表达.结论:在CHO细胞中高效表达GPI-B7-1融合蛋白,可获得大量融合蛋白,对进一步研究GPI-B7-1在肿瘤治疗中的应用打下基础.

关键词：糖基磷脂酰肌醇类、基因、B7-1、CHO细胞、真核表达、印迹法、蛋白质

所属期刊栏目：21

分类号：R363(病理学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划G1999053903

在线出版日期：2005-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：154-158