T4DNA连接酶介导的5'RACE法克隆大鼠Nor1全长cDNA

摘要：

目的:克隆75A EST全长cDNA序列.方法:抽提在25 mmol/L KCl条件下培养7d的大鼠小脑颗粒神经元的总RNA后,用DNA连接酶介导的5'RACE法克隆75A表达序列标签(EST)cDNA5'端未知序列,其产物亚克隆到pGEM-T easy后进行序列测定以及同源性分性.结果:首轮5'RACE扩增出2.5 kb序列后,75A EST鉴定为神经来源孤儿受体1(Nor1)基因的部分序列;再经过二次轮5'RACE,我们首次克隆Nor-1的全长cDNA序列.结论:T4dNA连接酶介导的5'RACE是一种效率较高的克隆mRNA5'端未知序列的好方法,为进一步研究Nor1在小脑颗粒神经元存活或分化过程中的作用奠定基础.

关键词：T4 DNA连接酶、5’cDNA末端快速扩增法、Nor1、小脑、神经元

所属期刊栏目：20

分类号：R363(病理学)

资助基金：国家自然科学基金39625022;国家自然科学基金39900181;广东省科技厅科技计划2KM028091

在线出版日期：2004-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：317-321