大鼠肺间质巨噬细胞CCK受体的结合特性

摘要：

目的:观察大鼠肺间质巨噬细胞(PIMs)胆囊收缩素(CCK)受体的表达亚型和结合特性.方法:用酶消化法结合肺泡耗竭灌洗和肺循环灌洗技术分离纯化大鼠PIMs,超速离心法提取细胞膜,与[3H]标记的硫酸化CCK-8([3H]-CCK-8S)进行放射配基结合实验,用非标记的CCK-8S、CCK-A受体(CCK-AR)特异性拮抗剂CR1409及CCK-B受体(CCK-BR)特异性拮抗剂CR2945进行竞争抑制实验,观察配体受体结合的特异性及CCK受体表达亚型,观察孵育时间和温度对特异性结合的影响.结果:正常大鼠PIMs未能检出特异性结合,静脉注射脂多糖(LPS)48 h出现特异性结合,且对孵育时间与温度有依赖性.经Scatchard分析,平衡解离常数(Kd)值为:(0.68±0.28)nmol·L-1,最大结合容量(Bmax)值为(32.50±2.70)pmol·g-1蛋白.通过竞争抑制实验,[3H]-CCK-8S与膜的结合可被CCK-8S、CR1409、CR2945所抑制,其IC50值分别为:(3.20±1.13)nmol·L-1,(0.19±0.06)μmol·L-1和(2.30±0.80)nmol·L-1.结论:大鼠PIMs存在CCK-A和CCK-B两种受体亚型,为CCK对生理及病理条件下巨噬细胞发挥效应提供了直接的结构依据.

关键词：胆囊收缩素、受体、肺间质巨噬细胞、脂多糖、放射配基结合实验

所属期刊栏目：20

分类号：R971.9;R342.22(药品)

资助基金：国家自然科学基金30270529;河北省自然科学基金303452;河北省博士科研项目B2003111

在线出版日期：2004-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：295-299