10.3321/j.issn:1000-4718.2004.01.026
APPSWE转基因鼠的繁育及子代鉴定的研究
目的:探讨老年性痴呆(AD)转基因模型鼠(TgAPPSWE2576杂合子鼠,Tg2576)的优化繁育方法,鉴定APPSWE基因阳性的子代鼠,为下一步AD研究奠定基础.方法:(1)用3种不同的交配方式观察子代鼠的存活率及APPSWE基因阳性的比率;(2)从子鼠鼠尾中提取基因组DNA,用PCR方法扩增APPSWE基因片段,电泳后观察结果;(3)PCR产物装入pGEM-T easy载体中,测序证实其基因序列.结果:雄性和雌性Tg2576互交,所产4窝子鼠,2 d内全部死亡.雄性Tg2576和雌性C57BL交配所产子鼠存活率81%,APPSWE基因的阳性率为43.3%.雌性Tg2576和雄性C57BL交配存活率82.4%,APPSWE基因的阳性率21.9%.经秩和检验两种繁育方式所产子鼠的存活率无显著差异(P>0.05),APPSWE基因的阳性率有显著差异(P<0.05).琼脂糖电泳显示PCR产物分子量为428 bp,与目的基因片段相对分子质量大小一致;DNA序列测定证实PCR产物基因序列和APP片段基因序列一致,并存在APPSWE(K670N,M671L)突变.结论:雄性Tg2576和雌性C57BL品系小鼠交配是繁育APPSWE基因阳性子鼠的较好方法;本实验所用PCR方法能够精确鉴定APPSWE基因阳性子鼠,为AD的实验研究提供了较理想的动物模型.
阿尔茨海默病、繁殖、小鼠、转基因、基因鉴定
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R363(病理学)
广东省自然科学基金20013137
2004-04-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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