低氧对心脏成纤维细胞增殖细胞核抗原表达与表型的影响

摘要：

目的:观察不同程度低氧对乳鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖细胞核抗原(PCNA)表达与表型的影响.方法:分离、纯化、培养乳鼠CFs,随机分为3组:对照组、中度低氧组和重度低氧组,以四唑盐(MTT)比色法检测细胞的增殖情况,采用免疫组织化学的方法检测PCNA的表达情况,电镜观察细胞的超微结构,并采用激光共聚焦显微镜检测各组细胞内α-actin的表达情况.结果:中度低氧组MTT的490 nm吸光度值(A490 nm)较对照组增加(18.4±25.0)% (P＜0.05),而重度低氧组A490 nm值较对照组降低(15.8±25.0)%(P＜0.05).免疫组化结果显示:对照组CFs的PCNA有一定的基础表达,核内阳性反应颗粒较少,染色强度为(92.2±9.1)% AU,中度低氧组CFs的PCNA染色强阳性,可见密集的阳性反应颗粒,染色强度为(128.0±11.4)% AU(P＜0.05 vs对照组),重度低氧组CFs核内无明显的阳性反应颗粒,染色强度为(89.9±8.4)%AU.透射电镜下,正常组CFs呈梭形,胞浆内有丰富的粗面内质网和高尔基复合体,线粒体和微丝的含量较少,无基膜存在,呈典型的成纤维细胞表型.中度低氧刺激72 h,CFs粗面内质网明显减少,胞浆内出现大量的微丝,以质膜下分布最多,呈现肌成纤维细胞表型.重度低氧组CFs内仅有少量的微丝.激光共聚焦显微镜显示,对照组CFs内无明显的α-actin表达,平均荧光值为1 119.31±112.24.中度低氧组细胞内出现大量规则排列的成束的微丝,α-actin表达显著增加,平均荧光值为1 638.37±173.42(P＜0.05 vs 对照组).重度低氧组细胞内α-actin表达较少,平均荧光值为1 227.52±228.33,与对照组无显著差异.结论:中度低氧可使乳鼠CFs PCNA表达增加,并且出现肌成纤维细胞的表型特点,而重度低氧无此作用,其具体机制尚待进一步研究.

关键词：缺氧、心脏成纤维细胞、增殖细胞核抗原、表型、肌动蛋白类

所属期刊栏目：19

分类号：R363(病理学)

资助基金：国家自然科学基金39970327

在线出版日期：2003-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1311-1315