10.3321/j.issn:1000-4718.2003.09.003
血管生成抑制因子arresten基因原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达
目的:构建血管生成抑制因子arresten基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达.方法: 利用聚合酶链式反应(PCR),由我们构建的重组质粒pGEM-Arr中扩增出arresten基因; 采用基因重组技术,将该基因定向克隆于原核表达载体pRSET中,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,并对表达产物行SDS-PAGE分析.结果:酶切鉴定和DNA测序证实arresten基因正确地插入表达载体中.重组arresten在大肠杆菌中获得高效表达,其分子量约为26 kD,表达量约占菌体总蛋白量的30%. 结论: Arresten基因原核表达载体的成功构建和重组arresten蛋白在大肠杆菌中的高效表达,为进一步研究其生物学功能奠定了基础.
基因、arresten、载体、基因表达
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R363(病理学)
国家自然科学基金30271242
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
1161-1164