10.3321/j.issn:1000-4718.2002.06.017
NK4基因在人胰腺癌细胞中的表达及其对血管内皮生长的影响
目的:构建NK4基因真核表达载体并进行转染研究.方法:对重组质粒pcDNA3/hNK4进行酶切,将目的基因NK4克隆到较强的真核表达载体pRC/CMV2中,应用脂质体将NK4基因转染到胰腺癌细胞株SW1990中,G418筛选获得稳定表达克隆,采用RT-PCR及Western blot鉴定及筛选出高转录和高表达的细胞克隆.以MTT法检测转染重组质粒pRC/CMV2-hNK4的细胞克隆表达产物对血管内皮细胞生长的影响.结果:在转染NK4基因的SW1990细胞克隆中,RT-PCR能扩增出NK4 mRNA预期的453bp片段,但强弱不同,Western blot显示均有约50 kD的NK4蛋白的表达.其上清可显著抑制血管内皮细胞的生长.结论:重组质粒pRC/CMV2-hNK4是一种高效真核表达载体,并且能够在SW1990细胞中高表达;NK4能够抑制血管内皮细胞的生长,提示其在肿瘤基因治疗中可能具有重要意义.
基因、基因疗法、胰腺肿瘤、内皮、血管
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R735.9(肿瘤学)
广东省博士启动基金001355
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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