G亚属猴腺病毒荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

摘要：

目的 建立G亚属猴腺病毒( simian adenovirus,SAdV)特异的荧光定量PCR (FQ-PCR)检测方法,并研究实验猴群和猴源性生物制品中SAdV感染或污染情况.方法 根据G亚属SAdV基因保守区,设计特异性引物和TaqMan探针.制备重组质粒pGEM-TEasy-SAdVpol标准品,建立标准曲线.经灵敏度、特异性、准确性和重复性评价后,检测33份猴粪便样本和4批次脊髓灰质炎疫苗.结果 建立的FQ-PCR检测方法特异检测G亚属,与A、F亚属无交叉反应,准确性及重复性较好.标准曲线相关系数0.999,线性范围6 1g(60～6×106拷贝),最低检出限可达6拷贝/μl.33份猴粪便样本中15份为阳性(45.5％),4批脊髓灰质炎疫苗均为阴性.结论 建立的FQ-PCR检测方法可定量检测G亚属SAdV拷贝数,初步应用表明我国实验猴群中G亚属SAdV流行率较高,应加强监测避免人类感染的潜在风险.

关键词：猴腺病毒、荧光定量PCR、检测方法

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分类号：Q95-33;R373.9(动物学)

资助基金：国家科技支撑计划课题2011BAI15B01

在线出版日期：2013-01-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：432-435