二甲双胍对人胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响

摘要：

背景与目的:近年研究发现二甲双胍对多种肿瘤具有抑制作用,部分临床研究也发现二甲双胍可以降低糖尿病并发胰腺癌的风险和降低胰腺癌的死亡危险.本研究从细胞水平着手研究二甲双胍对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能机制.方法:体外培养人胰腺癌细胞株Bxpc-3,予二甲双胍进行干预作为二甲双胍干预组,无药物组作为对照组.以MTT检测二甲双胍对Bxpc-3细胞存活率的影响,流式细胞术检测二甲双胍对Bxpc-3细胞周期的影响,流式细胞术及Hoechst?33258荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR检测AMPKα1、Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cyclin? D1? mRNA的表达.蛋白质印迹法(Western? blot)检测Cyclin? D1、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达.结果:与对照组相比,MTT检测结果显示,二甲双胍可以抑制人胰腺癌细胞株Bxpc-3的增殖,并呈时间-浓度依赖性(F=8.99、124和114.61,P<0.01);流式细胞术检测结果显示,二甲双胍干预组与对照组相比,G0/G1期细胞所占百分比增加(t=-8.71,P<0.01),S期(t=7.54,P<0.01)及G2/M期(t=7.00,P<0.01)细胞所占百分比减少;流式细胞术(早期凋亡率t=-2.68,晚期凋亡率t=1.29,总凋亡率t=-0.85)及Hoechst?33258荧光染色法(t=-0.46)结果显示,两组细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);RT-PCR结果显示,二甲双胍干预组Cyclin? D1? mRNA表达明显降低(t=4.96,P<0.01),AMPK?α1、Bax、Bcl-2、Caspase-3? mRNA表达与对照组相比,差异无统计学意义(t=1.68、-0.56、-1.80、0.67,P>0.05);Western?blot结果显示,二甲双胍干预组Cyclin?D1蛋白表达明显降低(t=7.02,P<0.01),Bax、Bcl-2、Caspase-3?蛋白表达与对照组相比,差异无统计学意义(t=-0.11、-0.20,?0.11,? P>0.05).结论:二甲双胍能显著抑制人胰腺癌细胞株Bxpc-3的增殖,机制主要与其阻滞细胞周期、下调Cyclin? D1表达有关;二甲双胍对Bxpc-3细胞的凋亡无明显诱导作用.

关键词：二甲双胍、人胰腺癌细胞株Bxpc-3、增殖、凋亡

分类号：R735.9(肿瘤学)

在线出版日期：2013-01-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：801-807