hMLH1基因启动子甲基化与非小细胞肺癌细胞顺铂耐药方面的研究

摘要：

背景与目的:hMLH1启动子甲基化是肺癌发生、发展的因素之一,但与肺癌细胞耐药方面的研究尚未见报道,本研究旨在探讨是否能通过去甲基化作用恢复hMLH1基因表达从而逆转A549/DDP细胞对顺铂的耐药.方法:RT-PCR检测A549及A549/DDP细胞的hMLH1表达情况,及5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-eoxycytidine,5-Aza-CdR)干预A549/DDP细胞后hMLHI表达情况;MSP检测A549、A549/DDP细胞及5-Aza-CdR干预A549/DDP细胞后hMLH1甲基化状态.MTT试验、Hoechst33258染色、流式细胞仪(FCM)分别观察5-Aza-CdR干预前后顺铂对A549/DDP细胞抑制率、凋亡的形态学变化和凋亡指数.结果:hMLH1 mRNA在A549中的表达高于A549/DDP细胞;A549细胞hMLH1为非甲基化状态,A549/DDP细胞为部分甲基化状态,经5-Aza-CdR去甲基作用后hMLH1呈非甲基化状态;A549组、A549/DDP组、经10 μmol/L 5-Aza-CdR干预后的A549/DDP组经顺铂作用后的IC50值分别为(4.7±0.7)、(30.1±1.8)和(6.9±0.6)μmol/L:5-Aza-CdR干预后的A549/DDP细胞经顺铂作用后,比单用顺铂抑制A549/DDP细胞的凋亡形态学改变明显,凋亡小体以及核固缩现象增多.结论:hMLH1甲基化可能参与了A549/DDP细胞的顺铂耐药过程;5-Aza-CdR能抑制hMLH1甲基化,恢复hMLH1表达,并能增强顺铂对A549/DDP细胞增殖抑制和凋亡.

关键词：hMLH1基因、甲基化、5-Aza-CdR、非小细胞肺癌、化疗耐药

所属期刊栏目：20

分类号：R734.2(肿瘤学)

在线出版日期：2010-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：508-514