1例慢性HIV-1感染者体内CD4结合位点特异性记忆B细胞分选及抗体表达研究

摘要：

目的 通过抗原特异性记忆B细胞(Memory B)分选、抗体基因克隆表达和鉴定方法,从艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者中获得HIV-1中和抗体,并进一步探讨获得抗体的特征.方法 通过检测血浆中和抗体活性和表位筛选,挑选出1例含有CD4结合位点(CD4bs)特异性抗体的慢性HIV-1感染者.采用一对含有/缺失CD4-bs的探针RSC3/ΔRSC3进行Memory B分选,获得抗体可变区基因后进行抗体的表达纯化,并检验所得抗体的结合能力和中和能力.结果 从9×106外周血单核淋巴细胞(PBMCs)中分离得6个特异性Memory B.通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别扩增出3对重链和轻链可变区基因,配对得到3个抗体,其中有一个抗体具有HIV-1CD4bs结合能力.中和实验表明,这个抗体能中和毒株SF162”50％抑制浓度(IC50=0.89μg/mL”.抗体可变区基因家系分析表明,该抗体属于IGHV1-18家系,重链可变区(VH)自体突变率为12％,低于广谱中和抗体VRC01VH的自体突变率(32％).结论 建立的单克隆特异性Memory B分选方法,可以获得有中和能力的抗体.该平台有希望获得具有我国自主知识产权的广谱中和抗体,并为开发抗体药物和设计新型免疫原提供技术支持.

关键词：艾滋病病毒1型、广谱中和抗体、CD4结合位点、单个B细胞分选

所属期刊栏目：22

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家十二五重大传染病防治研究项目2014ZX10001001-002;传染病预防控制国家重点实验室基金2012SKLID103,2015SKLID506;中国疾病预防控制中心青年基金2013A102 Supported by the National Science and Technology Major Project 2014ZX10001001-002;SKLID Development grant 2012SKLID103,2015SKLID506;China CDC Youth Fund 2013A102

在线出版日期：2016-07-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：402-406