载脂蛋白E影响星形胶质细胞基质金属蛋白酶-9表达的机制研究

摘要：

目的 探讨载脂蛋白E(ApoE)影响星形胶质细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的机制.方法 (1)体外培养C57BL/6J种属的野生型(WT)和ApoE基因敲除型(ApoE-/-)乳鼠的星形胶质细胞,利用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体行免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞.(2)将WT和ApoE-/-乳鼠星形胶质细胞分别分为空白对照组(Control组)、阴性对照组(NC组)和阳性沉默组(KD组),Control组不加任何病毒,NC组加入阴性对照慢病毒,KD组加入沉默p65基因的阳性慢病毒,用siRNA慢病毒沉默星形胶质细胞核因子-κB(NF-κB)p65基因,抑制NF-κB信号转导,应用Western blot检测NF-κB p65蛋白的表达,ELISA法检测细胞MMP-9和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度.(3)用TNF-α刺激上述各组细胞24h,ELISA法检测刺激前后各组细胞MMP-9的浓度.结果 (1)KD组两种细胞NF-κB p65蛋白的表达水平、MMP-9和TNF-α 的浓度均显著低于Control组和NC组(P<0.05);而Control组和NC组细胞NF-κB p65蛋白的表达水平、MMP-9和TNF-α的浓度间的差异无统计学意义(P>0.05).(2)ApoE-/-细胞MMP-9和TNF-α的浓度在Control组和NC组中均高于WT细胞(P<0.05);而在KD组中与WT细胞无明显差异(P>0.05).(3)TNF-α刺激24h后,Control组和NC组两种细胞MMP-9的浓度均升高(P<0.05);而KD组MMP-9的浓度无明显变化(P>0.05).结论 ApoE可能通过 TNF-α/NF-κB 信号通路影响星形胶质细胞MMP-9表达,从而影响血脑屏障的完整性.

关键词：载脂蛋白E、星形胶质细胞、MMP-9、TNF-α、NF-κB信号通路

所属期刊栏目：37

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金;广西壮族自治区自然科学基金

在线出版日期：2020-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：388-392