GFP-Nurr1基因修饰神经干细胞的建立及过表达Nurr1对神经干细胞向多巴胺神经元分化的影响

摘要：

目的 利用慢病毒载体建立GFP-Nurr1基因修饰的原代神经干细胞(NSCs)模型并观察Nurr1过表达后NSCs向多巴胺神经元的分化影响.方法 利用基因重组构建pLenO-DCE-Nurr1慢病毒载体,用慢病毒转染第三代NSCs,转染72 h后荧光检测转染效果;设置空白对照组、空载体组及DCE-Nurr1组,分别用Western blot及PCR检测Nurr1的表达差异;并将转染后的NSCs分化培养7d后分别用免疫细胞化学检测、Western blot及PCR检测酪氨酸羟化酶(TH)的表达.结果 慢病毒转染NSCs72h后,转染率可达90%,与对照组相比DCE-Nurr1组高表达Nurr1.经慢病毒载体感染后的NSCs仍具备分化潜能,分化培养后发现DCE-Nurr1组分化的神经细胞中TH阳性细胞分化率90.60%,对照组为21.2%.结论 慢病毒载体可高效转染NSCs过表达Nurr1;Nurr1基因过表达可以促进中脑腹侧来源NSCs向TH阳性多巴胺能神经元方向分化.

关键词：Nurr1、基因修饰、慢病毒、神经干细胞

所属期刊栏目：34

分类号：R651(外科学各论)

资助基金：国家自然科学基金地区科学基金项目81360197;国家自然科学基金项目81241126;云南省教育厅科学研究基金项目2013C227;云南省干细胞与再生医学重点实验室开放课题201401UH00160

在线出版日期：2017-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：388-392