SH-SY5Y神经细胞APP高表达对胆碱酯酶活性影响
目的 研究类阿尔茨海默病(AD)神经细胞模型中APP异常代谢下胆碱酯酶活性变化,探讨AD的发病机制.方法 采用脂质体转染法将含有瑞典家族性AD双突变的淀粉样蛋白前体蛋白APP670/671基因(APP_(SWE))转染至神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中;利用实时荧光定量PCR方法和Western blotting的方法测定APP mRNA、可溶性APP(αAPPs)和总APP蛋白表达水平;采用改进的Ellman比色法测定细胞培养基中乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)及丁酰胆碱酯酶(Butyrylcholinesterase,BuChE)活性.结果 转染APP_(SWE)质粒的SHSY5Y细胞APP总mRNA和蛋白表达水平显著升高,αAPPs分泌量下降.转染组SH-SY5Y细胞与对照组相比,AChE和BuChE活性都升高.结论 体外神经细胞实验证明APP蛋白过度表达能升高AChE和BuChE的活性,其机制可能与APP蛋白代谢紊乱使A13升高及下调αAPPs分泌有关.
淀粉样蛋白前体蛋白、胆碱酯酶、神经母细胞瘤细胞
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R749.1+6(神经病学与精神病学)
国家自然科学基金资助项目30870986;科技部基金资助项目2006DFA33530;贵州省科技厅基金项目黔科合J字[2007]2087号
2016-09-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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