重组大鼠质粒pEGFP-GDNF的构建及真核细胞转染

摘要：

目的构建携带大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因的真核细胞表达载体,为应用GDNF进行如帕金森综合征之类的神经元退化性疾病的基因治疗打基础.方法采用RT-PCR方法从大鼠胎脑组织总RNA中扩增出该基因的cDNA序列,并克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-C1中,对重组质粒pEGFP-GDNF进一步鉴定.采用电转及阳离子脂质体将重组质粒pEGFP-GDNF转染至SH-SY5Y细胞.结果大鼠GDNF cDNA已正确地克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,而构建成重组大鼠质粒pEGFP-GDNF.GDNF基因可稳定表达在细胞中.结论真核细胞表达载体pEGFP-GDNF以及表达GDNF工程细胞SH-SY5Y的成功构建,为进一步开展GDNF基因治疗PD等中枢神经系统疾病奠定了基础.

关键词：胶质细胞源性神经营养因子、真核表达载体、重组、基因治疗、转染细胞

所属期刊栏目：22

分类号：R394;R742.5

资助基金：上海市重点项目024119037;上海市引进海外高层次留学人员专项基金2004-1-5

在线出版日期：2005-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：104-106