针刺激活Ⅲ型PI3K/Beclin-1通路调控脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧海马区细胞自噬
目的:观察针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧海马组织Ⅲ型磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)及Beclin-1等自噬相关指标的影响,探讨针刺调控Ⅲ型PI3K/Beclin-1 通路适度激活脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧海马神经细胞自噬的作用机制.方法:SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、针刺组、模型+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、针刺+3-M A组,每组11只.使用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型.模型+3-MA组、针刺+3-M A组于再灌注前 30 min予侧脑室注射 3-MA 5 mL(400 nmol/5 mL).针刺组、针刺+3-MA组针刺"大椎""水沟""百会",每 15 min捻转 1 次,留针 30 min,每 12h治疗 1 次,共7 次.于再灌注后2h、干预后进行Garcia神经功能评分,干预后通过TTC染色法观察大鼠脑组织缺血面积百分比,Western blot法检测缺血侧海马组织 Ⅲ 型 PI3K、Beclin-1、自噬标志物微管相关蛋白 1 轻链 3B(LC3B)、溶酶体相关膜蛋白 2(Lamp2)、P62的蛋白表达水平,透射电镜法观察缺血侧海马组织神经细胞超微结构.结果:再灌注后与假手术组比较,其余各组大鼠神经功能评分降低(P＜0.01).与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分显著降低、脑梗死面积百分比升高(P＜0.01),缺血侧海马组织Ⅲ型PI3K、Beclin-1、LC3B-Ⅱ/Ⅰ、Lamp2 表达显著降低(P＜0.01),P62 表达显著升高(P＜0.01),神经细胞水肿较重.与模型组比较,干预后针刺组神经功能评分升高、脑梗死面积百分比降低(P＜0.01),缺血侧海马组织Ⅲ型PI3K、Beclin-1、LC3B-Ⅱ/Ⅰ、Lamp2 表达升高(P＜0.01,P＜0.05),P62 表达降低(P＜0.01),神经元结构未见明显损伤,溶酶体增多;模型+3-MA组脑梗死面积百分比升高(P＜0.05),Ⅲ型PI3K、Beclin-1 表达降低(P＜0.01),P62 表达水平升高(P＜0.05),神经细胞中重度水肿,初级溶酶体存在.与模型+3-M A 组比较,针刺+3-MA组神经功能评分显著升高、脑梗死面积百分比显著降低(P＜0.05,P＜0.01),缺血侧海马组织Ⅲ型PI3K、Beclin-1、LC3B-Ⅱ/Ⅰ表达升高(P＜0.01,P＜0.05),神经细胞轻度水肿,初级溶酶体存在.与针刺组比较,针刺+3-MA组神经功能评分显著降低、脑梗死面积百分比升高(P＜0.05,P＜0.01),缺血侧海马组织Ⅲ型PI3K、Beclin-1、Lamp2表达水平降低(P＜0.01,P＜0.05),P62 表达水平升高(P＜0.05).结论:针刺可改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能缺损症状,减少脑梗死面积,其机制可能与调控Ⅲ 型PI3K/Beclin-1 通路,上调海马区自噬相关因子 LC3B-Ⅱ/Ⅰ、Lamp2 表达,下调P62 表达有关.
脑缺血再灌注损伤、针刺、细胞自噬、Ⅲ型PI3K/Beclin-1通路
48
R246.1(中医临床学)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;湖南省自然科学基金项目;湖南省自然科学基金项目;长沙市科技局自然科学基金项目;湖南省研究生科研创新课题;湖南中医药大学研究生创新课题;湖南中医药大学研究生创新课题
2023-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
423-430
