基于组蛋白去乙酰化酶2介导的成骨细胞分化通路探讨电针治疗骨质疏松症的效应机制
目的:观察电针对骨质疏松大鼠股骨组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)、组蛋白H3、骨形成相关基因及蛋白表达的影响,探讨电针改善骨质疏松症的机制.方法:将雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组和阳性药物(E2)组,每组10只.采用去势法建立骨质疏松大鼠模型.电针组电针双侧"肾俞""脾俞"穴,10 min/d;E2组予20μg/mL 17β-雌二醇(E2)皮下注射,100μg/kg.均每周一、三、五治疗,共治疗8周.采用显微计算机断层扫描成像法检测大鼠股骨组织微观结构变化;蛋白质免疫印迹法检测大鼠股骨HDAC2、组蛋白H3和成骨细胞转录因子(Runx2)蛋白表达;比色法及酶联免疫吸附法检测大鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)和E2含量;实时荧光定量PCR法检测大鼠股骨Runx2 mRNA表达;免疫荧光双标法检测大鼠股骨中乙酰化组蛋白H3/Runx2及Runx2/ALP蛋白的共表达.结果:与假手术组比较,模型组股骨松质骨密度(TBMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)均显著降低(P<0.01),骨小梁分离度(Tb.Sp)、骨小梁模式因子(Tb.Pf)、结构模型指数(SMI)均显著升高(P<0.01).与模型组比较,电针组大鼠股骨TBMD、BV/TV和Tb.N显著升高(P<0.01,P<0.05),Tb.Pf和SMI显著下降(P<0.05,P<0.01);E2组大鼠股骨TBMD、BV/TV和Tb.N显著升高(P<0.01),Tb.Sp、Tb.Pf和SMI均显著下降(P<0.01).与假手术组比较,模型组大鼠股骨中HDAC2、组蛋白H3表达水平显著升高(P<0.01),Runx2蛋白和mRNA表达水平显著降低(P<0.01),血清E2和ALP含量显著降低(P<0.01),股骨中乙酰化组蛋白H3、Runx2、ALP的荧光强度显著降低(P<0.01).与模型组比较,电针组HDAC2、组蛋白H3表达水平显著降低(P<0.01),Runx2蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01),血清ALP含量显著升高(P<0.05),乙酰化组蛋白H3、Runx2、ALP荧光强度显著升高(P<0.01);E2组Runx2蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.01),血清E2和ALP含量显著升高(P<0.01,P<0.05),Runx2和ALP荧光强度显著升高(P<0.01).与E2组比较,电针组HDAC2和组蛋白H3蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Runx2 mRNA表达水平显著下降(P<0.05),乙酰化组蛋白H3荧光强度显著升高、Runx2荧光强度显著降低(P<0.05).结论:电针治疗骨质疏松可上调体内骨形成相关基因的表达,下调对骨形成通路有抑制作用蛋白的表达,使骨密度升高、骨体积和骨小梁数量增加,并促进骨小梁由杆状向板状变化,其机制可能与组蛋白乙酰化修饰有关.
电针、骨质疏松症、组蛋白去乙酰化酶2、组蛋白H3
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R245.9+7(中医临床学)
湖北省自然科学基金面上项目No.2017CFB787
2020-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
438-445
