针刺血清调控内质网应激反应对无镁诱导培养大鼠海马神经元惊厥性损伤的保护作用

摘要：

目的:观察针刺血清对无镁诱导惊厥样放电海马神经元凋亡数及内质网应激伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP 78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)和半胱氨酸蛋白酶蛋白-12(Caspase-12)表达的影响,探讨针刺血清对海马神经元惊厥性损伤的保护机制.方法:SD大鼠腹腔注射戊四唑诱发急性惊厥后分为针刺组及对照组.针刺组取“百会”“大椎”针刺,每日1次,共7d.末次针刺后,针刺组大鼠取血清作为针刺血清,对照组取血清作为非针刺血清.以无镁诱导惊厥样放电的原代培养胎鼠海马神经元为模型,根据对培养10 d海马神经元的不同处理分为正常细胞外液组(简称正常组)、无镁细胞外液组(简称无镁组)、针刺血清组和非针刺血清组.正常组将无血清培养液换成细胞外液培养3h后换液培养,其他各组用无镁细胞外液培养3h后换液培养.4组分别于换液培养2、12、48h3个时间点采用TUNEL法和Western blot法分别检测海马神经元凋亡情况及GRP78、CHOP和Caspase-12蛋白表达情况.结果:正常组仅见少量凋亡海马神经元;无镁组3个时间点凋亡海马神经元数均较正常组明显增加(P＜0.01);针刺血清组3个时间点凋亡海马神经元数与无镁组比较明显减少(P＜0.05,P＜0.01),与非针刺血清组12、48 h比较凋亡海马神经元数明显减少(P＜0.01).与正常组比较,无镁组3个时间点海马神经元CHOP和Caspase-12蛋白表达均明显增强(P＜0.05,P＜0.01),2h时间点海马神经元GRP 78蛋白表达明显增强(P＜0.05);与无镁组比较,针刺血清组3个时间点神经元GRP 78蛋白表达均明显增强(P＜0.01,P＜0.05),12、48 h时间点海马神经元CHOP蛋白表达明显减少(P＜0.05,P＜0.01),3个时间点神经元Caspase-12蛋白表达均显著减少(P＜0.05,P＜0.01);与非针刺血清组相比,针刺血清组2、12h时间点海马神经元GRP 78蛋白表达均明显增强(P＜0.01,P＜0.05),12、48 h时间点海马神经元CHOP蛋白表达明显减少(P＜0.05),3个时间点海马神经元Caspase-12蛋白表达均明显减少(P＜0.01,P＜0.05).结论:针刺血清能明显减少海马神经元凋亡数,上调GRP 78蛋白表达,下调CHOP和Caspase-12蛋白表达,发挥维持内质网稳定性的重要作用.

关键词：针刺血清、惊厥、细胞凋亡、GRP 78蛋白、CHOP蛋白、Caspase-12蛋白、内质网应激

所属期刊栏目：42

分类号：R245.31+1(中医临床学)

资助基金：国家自然科学基金81072872;安徽高校科研平台创新团队项目2015 TD 033;安徽省高校自然科学研究重点项目KJ 2016 A 858

在线出版日期：2017-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：95-101