电针通过抑制下丘脑细胞外调节蛋白激酶5信号通路改善手术创伤大鼠脾脏自然杀伤细胞的功能

摘要：

目的:观察下丘脑内细胞外调节蛋白激酶(ERK)5信号通路在电针改善手术创伤大鼠脾脏自然杀伤(NK)细胞功能中的作用及机制.方法:SD雄性大鼠随机分为对照组、创伤组、创伤+电针组、创伤+未电针组、创伤+低剂量BIX 02188组、创伤+高剂量BIX 02188组,每组6只.采用手术创伤模型,创伤+电针组选取双侧“足三里”穴,术后立刻电针,创伤+未电针组针刺双侧“足三里”穴,但不接电针仪,均持续30 min,创伤+低剂量BIX 02188组、创伤+高剂量BIX 02188组于造模前1周进行侧脑室埋管,手术创伤前30 min注射BIX 02188.免疫组化法和Western blot法观察下丘脑ERK 5磷酸化水平和蛋白表达,及促肾上腺皮质激素释放激素(CRF)蛋白表达,乳酸脱氢酶释放法和Real-time PCR法检测脾脏NK细胞杀伤功能及穿孔素(Perforin)和颗粒酶B(Granzyme B)的mRNA表达.结果:创伤组大鼠下丘脑内ERK 5信号通路显著激活,ERK 5磷酸化水平及蛋白表达均升高(P＜0.01,P＜0.05),电针及ERK 5抑制剂均可抑制ERK 5的磷酸化(P＜0.05,P＜0.01);手术创伤后,脾细胞Perforin及Granzyme B的mRNA明显下调,脾脏NK细胞的杀伤活力下降(P＜0.01,P＜0.05),电针治疗可增加Perforin及Granzyme B的基因表达,进而提高脾脏NK细胞的杀伤活力(P＜0.05);下丘脑内CRF的表达在创伤后明显上升(P＜0.01),给予ERK 5抑制剂或电针均可下调其表达(P＜0.01).结论:电针改善手术创伤引起的脾脏NK细胞杀伤活力降低的机制之一可能是下调下丘脑内ERK 5信号通路的激活,减少CRF的产生,从而抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴激活.

关键词：电针、手术创伤应激、下丘脑、细胞外调节蛋白激酶5、促肾上腺皮质激素释放激素、脾脏自然杀伤细胞

所属期刊栏目：40

分类号：R245.9+7(中医临床学)

资助基金：国家自然科学基金项目No.81202746;国家重点基础研究发展计划No.2013 CB 531906

在线出版日期：2015-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：173-179