芒针透刺抗急性脊髓损伤细胞凋亡的信号转导机制
目的:观察芒针透刺对急性脊髓损伤后脊髓神经细胞凋亡的影响,探讨芒针透刺促进急性脊髓损伤修复的细胞信号转导机制和调节位点.方法:纯种健康新西兰家兔随机分为对照组、模型组、芒针透刺组、芒针+LY 294002组、芒针+PD 98059组,每组16只.采用Allen's法制备兔脊髓损伤模型.各治疗组均给予芒针透刺“秩边”“水道”“气海”“中极”,每日1次,共3次;芒针+LY 294002组及芒针+PD 98059组于造模前1h分别蛛网膜下腔穿刺给予抑制剂LY 294002(10 μg,20 μL)、PD 98059(3 μg,20μL).苏木素-伊红(HE)染色观察脊髓组织病理变化,原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测脊髓神经细胞凋亡率,免疫组化法检测蛋白激酶B(Akt)和细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)在脊髓的磷酸化(p)表达,蛋白质印迹法(Wes-tern blot)检测脊髓组织p-Akt和p-ERK1/2、细胞色素C(Cyt C)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达,酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果:HE染色及TUNEL结果显示,与对照组相比,模型组脊髓组织碎裂、结构紊乱、神经细胞凋亡较多,芒针透刺能减轻脊髓损伤,芒针透刺组与模型组相比神经元细胞凋亡明显减少(P＜0.05);免疫组化及Western blot结果显示,与对照组相比,模型组脊髓组织中p-Akt和p-ERK1/2蛋白明显下降,而Cyt C和Caspase-3的表达增多(均P＜0.05),与模型组比较,芒针透刺促进了p-Akt、p-ERK1/2的表达,减少了Cyt C和Caspase-3在脊髓中的表达水平(均P＜0.05);ELISA结果显示,与对照组相比,模型组血清TNF-α含量增多(P＜0.05),芒针透刺组与模型组相比血清TNF-α的含量降低(P＜0.05).而使用了LY 294002或PD 98059的两组均抑制了芒针对上述指标的调节作用,与芒针透刺组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:芒针通过细胞外和细胞内凋亡信号转导途径发挥了保护受损脊髓组织的作用.
芒针透刺、急性脊髓损伤、细胞凋亡、信号转导、血清肿瘤坏死因子-α
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R245.31+9(中医临床学)
浙江省中医药科研基金项目No.2008 CB 067
2014-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
259-266,277
