石榴花对棕榈酸诱导的HepG2细胞脂质沉积的改善作用及机制研究

摘要：

目的 探讨石榴花提取物(Punica granatum flower extract,PFE)及其活性成分白桦脂酸和木犀草素对棕榈酸诱导的人肝癌HepG2细胞脂质沉积的改善作用和作用机制.方法 通过CCK-8法测定棕榈酸、辛伐他汀、PFE、白桦脂酸和木犀草素对HepG2细胞活力的影响,以确定后续给药剂量.利用500μmol/L棕榈酸建立HepG2细胞脂质沉积模型,同时给予PFE(50、100、200mg/L)、白桦脂酸(40、80、160μmol/L)、木犀草素(40、80、160μmol/L)进行干预,采用油红O染色法测定细胞内脂质含量;GPO-PAP法测定细胞内三酰甘油(triglyceride,TG)和总胆固醇(Total cholesterol,TC)含量;流式细胞仪检测早、晚期凋亡细胞率;Western blotting检测凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X 蛋白(Bcl-2associated X protein,Bax)及磷脂酰肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B(phosphatidylinositol 3-kinase/proteinkinase B,PI3K/Akt)、Janus 激酶 2/信号传导及转录激活因子 3(Janus kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3,JAK2/STAT3)通路相关蛋白表达;qRT-PCR测定PI3K、Akt、JAK2、STAT3的mRNA表达.结果 选取对细胞活力无显著影响的PFE(50、100、200mg/L)、白桦脂酸(40、80、160μmol/L)和木犀草素(40、80、160μmol/L)进行后续实验.与对照组比较,模型组细胞内脂质、TC和TG含量均显著升高(P＜0.001),细胞凋亡率显著升高(P＜0.001),PI3K、Akt、Bax蛋白和PI3K、Akt mRNA表达水平均显著升高(P＜0.001),JAK2、STAT3、Bcl-2蛋白和JAK2、STAT3mRNA表达水平均显著下降(P＜0.001).与模型组比较,各给药组细胞内脂质、TC和TG含量均显著降低(P＜0.05、0.01、0.001),细胞早、晚期凋亡率显著下降(P＜0.01、0.001),细胞中PI3K、Akt、Bax蛋白和PI3K、Akt mRNA表达水平均显著降低(P＜0.05、0.001),JAK2、STAT3蛋白和mRNA表达水平均显著升高(P＜0.05、0.01、0.001),PFE组和白桦脂酸组Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(P＜0.01、0.001).结论 PFE、白桦脂酸和木犀草素能够改善棕榈酸诱导的HepG2细胞脂质沉积,其作用机制与抑制游离脂肪酸诱导的细胞凋亡、调控PI3K/Akt和JAK2/STAT3通路有关.

关键词：石榴花、高脂血症、脂质沉积、HepG2细胞、棕榈酸、白桦脂酸、木犀草素、凋亡、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路、Janus激酶2/信号传导及转录激活因子3通路

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;江西省教育厅科技重点项目;江西中医药大学科技创新团队发展计划

在线出版日期：2023-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2462-2470