基于miR-208a-3p探究萝卜硫素对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

摘要：

目的 探讨萝卜硫素对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制.方法 用10、20、40μmol/L萝卜硫素处理人正常肝细胞L02、肝癌HepG2细胞48h,通过CCK-8法筛选合适的萝卜硫素浓度用于后续实验;将HepG2细胞分为对照组和萝卜硫素(20μmol/L)组,CCK-8法检测细胞增殖;Transwell测定细胞迁移与侵袭.设置对照组、miR-208a-3p模拟物(miR-208a-3p mimic)组及其阴性对照(mimic NC)组、miR-208a-3p 抑制物(miR-208a-3p inhibitor)组及其阴性对照(inhibitor NC)组、真核翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiation factor 4E,EIF4E3)过表达物(pcDNA-EIF4E3)组及其阴性对照(pcDNA)组、EIF4E3小干扰 RNA(si-EIF4E3)组及其阴性对照(si-NC)组、pcDNA-EIF4E3+mimic NC 组和 pcDNA-EIF4E3+miR-208a-3p mimic 组,利用 LipofectamineTM 2000转染试剂盒对 HepG2细胞进行转染,转染48 h 后,各组分别加入20 μmol/L萝卜硫素处理24 h,qRT-PCR检测HepG2细胞中miR-208a-3p表达;CCK-8法检测细胞增殖;Transwell测定细胞迁移与侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-208a-3p与EIF4E3靶向关系;Western blotting检测细胞中EIF4E3蛋白表达.结果 与对照组比较,萝卜硫素组HepG2细胞在24、48 h的A450值、侵袭及迁移细胞数目显著降低(P＜0.05);HepG2细胞中miR-208a-3p呈高表达,EIF4E3蛋白呈低表达;miR-208a-3p靶向负调控EIF4E3的表达;下调miR-208a-3p或过表达EIF4E3可增强萝卜硫素对HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的抑制作用,而过表达miR-208a-3p或沉默EIF4E3则呈相反趋势;同时过表达miR-208a-3p和EIF4E3不会影响萝卜硫素对HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的抑制作用.结论 萝卜硫素可能通过下调miR-208a-3p进而上调EIF4E3的表达来抑制HepG2细胞增殖、侵袭及迁移.

关键词：肝癌、miR-208a-3p、萝 卜硫素、真核翻译起始因子4E、增殖

所属期刊栏目：53

分类号：R285.5(中药学)

在线出版日期：2022-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1450-1457